El 29 de septiembre de 1538, Sucre fue fundada bajo el nombre de Ciudad de la Plata de la Nueva Toledo por Pedro de Anzures, Marqués de Campo Redondo, por órdenes de Pizarro. En ese lugar habitaban indígeneas denominados "Choquechacas", los cuales no opusieron resistencia a los colonizadores españoles. Posteriormente esta ciudad adquirió gran importancia por la proximidad a las minas de Porcko y Potosí. En 1559 el Rey Felipe II estableció la Audiencia de Charcas en "La Plata", con autoridad sobre el área que hoy es el actual país de Paraguay, el sudeste peruano, el norte de Chile y Argentina y gran parte de lo que hoy es Bolivia. En 1609, un arzobispado fue fundado en la ciudad. En 1624 se fundó la Universidad Mayor Real y Pontificia de San Francisco de Xavier de Chuquisaca. En el siglo XVIII se unió al Virreinato de La Plata.

Hasta el siglo XVIII, La Plata fue el centro judicial, cultural y religioso de la región. El 25 de Mayo de 1809, Charcas fue testigo del Primer Grito Libertario de América[cita requerida], el cual tuvo posteriores réplicas en todo el Alto Perú y posteriormente en otras latitudes del Sudamérica. Los estudiantes de la Universidad San Francisco Xavier se rebelaron, seguidos por el pueblo, pidiendo la liberación de Jaime Zudañez— acusado y tomado prisionero por "conspiración" el mismo día— y la renuncia del presidente de la Audiencia de Charcas, Pizarro. Éste dijo que con un Pizarro empieza la colonia del alto Perú y con otro termina. Como llamada al pueblo se tocó una de las campanas de la iglesia de San Francisco hasta que ésta se rajó, la ahora llamada Campana de la Libertad, que repica cada 25 de mayo en honor a la "chispa de la Liberación Americana".

En 1825 fue testigo de la firma del acta de fundación de la República de Bolivia en la Histórica Casa de la Libertad. En 1839, después de que la ciudad se convirtió en la capital de Bolivia, fue rebautizada en honor del héroe revolucionario Gran Mariscal de Ayacucho Antonio José de Sucre. Tras el declive económico de Potosí, Sucre apareció demasiado lejos de la ruta de la riqueza económica, lo que motivó que el Gobierno Boliviano se trasladase a La Paz en 1898 después de una guerra civil entablada entre los poderes económicos de la plata y el estaño. En 1991, Sucre fue declarada Patrimonio de la Humanidad por la UNESCO.

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